天博体育 采用相干公司轴突780光纤激光器的双光子代谢flim

天博体育＆hickl gmbh是光子计数设备的技术领导者，早些时候已经表明，早些时候已经表明，小型飞秒光纤激光器可用作多光子荧光成像系统的廉价激发源。激光器的发射波长为780nm，脉冲频率为40MHz至80MHz，平均功率为100mW至500mW，500 mW，不仅适用于激发nad nad nAD（

因此，天博体育＆Hickl有兴趣了解Axon飞秒光纤激光器在这些应用中的性能。

图1：相干轴突780

 

系统架构

作为测试系统，他们使用bh dcs-1220 mp多光子flim系统。该系统的架构如图2

Axon 780激光器的激光器激光束通过自由光束注入dcs-1220扫描头。在扫描头内部

 

为了获得最大的空间分辨率，激光束必须完全填充显微镜透镜的后孔径。对于扫描和管透镜的通常焦距

从样品中收集荧光，通过显微镜透镜返回，然后通过非去扫描光束路径馈送。l1和L2形成望远镜。望远镜还收集显微镜透镜未完全准直的光子

反激相位激光束和光束消隐的扫描由bh gvd-140扫描控制器卡进行硬件控制。激光强度控制通过轴am控制信号输入执行。该信号也由aom控制信号输入执行。该信号也由gVd-140卡提供。整个系统由bh bh spcm spcm数据采集和控制软件数据采集和控制软件数据采集和控制软件数据采集和控制软件数据采集和控制软件【，提供具有扫描仪控制、激光器控制、数据采集和数据分析功能的完全集成

图3：spcm数据采集和控制软件的主面板

 

结果

使用dcs-120-axon组合拍摄的flim图像如图4至图4至图4至图4至图440x，na = 1.3 bh spcimage ng ng ng ng flim flim flim flim flim数据分析套件进行数据分析。图5 显示了平均（振幅加权）

图4：猪皮、 nadh 图像、双指数衰减的振幅加权平均寿命

 

图5：猪皮、 nadh 图像、振幅、 a1、快速衰变成分。a1是代谢状态的指标

 

图6显示了酵母细胞。选择发射滤光片来检测440至470nm，从而将光谱范围限制为检测nad（p）h。470nm的检测上限可能看起来非常严格。但是，为了避免检测fad fmnfmn荧光，必须限制在470nm nmnm以下。这些化合物与nadnad nad nad nad nad hhh一起被激发，spcimage ng ng ng，的数量。/游离比随代谢而变化，a1也称为“代谢指标”【1】。

 

可以看出，a1在不同细胞中明显不同。这表明不同细胞中的代谢状态不同。高a1（显示为蓝色）（a1（显示为蓝色），低

 

“我们已经证明，相干公司轴780飞秒光纤激光器与bh 的精确扫描仪光学元件器件、探测器、 tcspc/flim电子器件和数据分析软件相结合，可提供有关活细胞和组织代谢的准确信息。”凭借其基于aoM的内部强度控制

 

参考文献

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