coherent Axon 780ファイバー天博综合app官网登录ザ搭载の2flim

光子计数装置の技术リーダーである天博综合app官网登录＆hickl GmbH は、小型フェムト秒ファイバーレーザがマルチフォトン蛍光イメージングシステムの安価な励起源として使用できることを以前に示しました。780 nm の発光波长、40 MHz ～80 MHz ～80 MHz のパルスレート、100 MW 100 MW ～500 MW nAD（P）hの励起だけでなく、非常に短い蛍光寿命 [3、4、5]

そのため、ベッカーとヒックルは，轴突フェムト秒ファイバー天博综合app官网登录ザがこれらの用途でどのように机能するかに兴味を持っていました。

図1：相干轴突780

 

システムアーキテクチャ

テストシステムとして、 bh dcs-1220 mpマルチフォトンflimシステムを使用しました。このシステムのアーキテクチャを図2

Axon 780 天博综合app官网登录ザの天博综合app官网登录ザ天博综合app官网登录ザビームは、フリービームを介して dcs-1220 スキャンヘッドに注入されます。スキャンヘッド内では、2

 

最大空间分解能を得るには、天博综合app官网登录ザビームが顕微镜レンズの背面开口部を完全に満たすことが重要です。スキャンとチューブレンズの通常の焦点距离では、これは自动的には実现されません。したがって、ビームはスキャナに入る前に1.5倍に拡大されます。背面开口のビーム直径は约12毫米

サンプルからの蛍光光は顕微镜レンズを通して回收され、デカントされていないビーム経路を通して供给されます。l1 l2 l2 は、ペリスコープを形成します。また、顕微镜レンズによって完全にコリメートされていない光子、例えば、厚いサンプルから出て行く途中で散乱される光子も收集します。蛍光光は2 2つのbh hpm-100-40ハイブリッド検出器によって検出されます[6，7] 。検出器からの単光子パルスは、2 2 spc-spc-180n tcspc / flimモジュールに记录されます

フライバックフェーズでの天博综合app官网登录ザビームのスキャンとビームブランキングは、 bh gvd-140 axon スキャンコントローラカードによってハードウェア制御されます。天博综合app官网登录ザ强度制御は、 aom 制御信号入力を介して行われます。この信号は、 gvd-140 カードからも提供されます。システム全体は、 bh bh spcmデータ取得および制御ソフトウェア[1]

図3：SPCM

 

结果

dcs-120-axonの组み合わせで撮影したflim画像を図4 ～図4～図4～図6に示します。すべての画像に40x na = 1.3 bh spcimage ng ng ng flim flim flim flim flim flimデータ解析スイートを用いて実施した。図5 は、平均（振幅加重）

図4：ブタ皮肤、 nadh 画像、振幅加重による二重指数减衰の平均寿命

 

図5：高速减衰成分のブタ皮肤、 nadh 画像、振幅、a1。a1は代谢状态の指标です。

 

図6 は酵母细胞を示す。発光フィルターは、440 ～470 nm を検出するために选択され、したがって、スペクトル范囲をNAD（p）Hの検出に制限しました。470nm fad fad fad fad fam fmn蛍光の検出を避けるためには、470 nm未満に制限する必要があります。これらの化合物はnad nad（p）hとともに励起されますが、代谢状态への依存度は异なります。データは、 spcimage ng spcimage ng ng ng ng ng ng ng ng ng ng ng 2 2 2 a1 a1 a1 a1 a1、高速减衰コンポーネントの振幅を示しています。これは、非结合型nad（p）p）

1222天博综合app官网登录＆Hickl GmbH |相干276

ご覧のように、 a1 a1（青色で表示）

 

「coherent轴突780 フェムト秒ファイバー天博综合app官网登录ザと、 bh の精密スキャナ光学系、検出器、 tcspc/flim エレクトロニクス、データ分析ソフトウェアを组み合わせることで、生细胞や组织の代谢に关する正确な情报が得られることを実证しました」。内部aoM ベースの强度制御により、天博综合app官网登录ザはbhのspcmflim 取得ソフトウェアにスムーズに统合されます。ビームストップ状况やスキャナフライバックフェーズでのビームブランキングと再现性のある强度制御により、试料を局所的な光损伤から保护します。DCS-120 MP/axon 780 の组み合わせは、すべて、使いやすい高解像度、高感度、2 flim顕微镜です。

 

参考资料

1. w。 Beker，BH TCSPC手册。 第10版。天博综合app官网登录＆Hickl GmbH（2023），www.天博综合app官网登录-hickl.com。
2. w。贝克尔，c。 Junghans，h。 netz 、フェムト秒ファイバーレーザ付き 2 flim www.天博综合app官网登录-hickl.com
3. w。 天博综合app官网登录，C。Junghans，A。Bergmann，蘑菇孢子的两片flim は、超高速减衰コンポーネントを明らかにしています。アプリケーションノート（ 2021年）www.天博综合app官网登录-hickl.com
4. w。贝克尔，a。 Bergmann，c。 Junghans 、天然カロテノイドの超高速蛍光减衰。アプリケーションノート、 www。 天博综合app官网登录-hickl.com（2022）
5. w。贝克尔（C. 天博综合app官网登录-hickl.com（2023）
6. 天博综合app官网登录ザ走查顕微镜におけるW.贝克尔，b。苏k。魏斯哈特，o。 holub，flim，fcs検出：gaaspハイブリッド検出器による效率の向上。micr。 res。 技术74，804-811（2011）
7. 天博综合app官网登录＆Hickl GmbH 、ハイブリッド検出器およびMCP-PMTからのSUB-20PS IRF www.天博综合app官网登录-hickl.com