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天博体育官网 华盛顿大学:免疫学和其他研究的双激光多光子显微镜

挑战

DR。马克·米勒(Mark Miller)是圣路易斯华盛顿大学医学院的体内成像核心副主任,拥有悠久的建筑和使用多光子显微镜的历史,尤其是用于免疫经液研究。这包括对白天博体育官网运输和抗原表现的具有里程碑意义的调查,以及对计算生物学的新颖使用。例如,他的小组首先透露,T天博体育官网相对于APC(抗原呈递天博体育官网)靶标的蜂群不是由趋化因子梯度主导的,而是从随机运动开始的(Miller等,Science 2002,Miller等,PNAS,PNAS,PNAS,2004,2004,Miller等,Miller等,Jem,2004)。

自2012年以来,他还担任了体内成像核心的主任,他着手构建一个通用的多光子显微镜,并为跨学科研究人员开放访问以在研究体内研究感染性疾病时进行单天博体育官网官网官网官网成像。一个关键目标是包括两个独立可调的波长(Zinselmeyer等人,方法酶学,2009年),以实现多个荧光团的灵活实验。 Other prerequisites were laser ease of use to support a wide user base, and high reliability to enable efficient multi-user scheduling.


解决方案

DR。米勒最终选择修改市售范围,并为其装备两个变色龙视觉II天博体育官网,部分原因是以前有丰富的积极经验Chameleon Ultra Lasers在其免疫学实验室中。他补充说,他选择了Vision II模型,因为这些模型提供了所有钛的最长波长直接调谐范围:蓝宝石天博体育官网器。 “这为我们的合作者提供了全方位的激发选项,包括800 nm的自动荧光,900 nm的绿色(和氰基)荧光蛋白,以及1040 nm,可与Mfruit系列的红色荧光蛋白一起使用。长波长度也可用于最小化自动荧光和照相式实验,以最小化。

DR。米勒指出,创新服务/替换合同是天博体育官网选择的另一个关键因素。 “我们在早期天博体育官网器上遇到了几个问题。但是连贯的人立即使我们回到了100%的指定性能,唯一的停机时间实际上是将替换天博体育官网器运送到我的实验室的时候。”尽管他对II Vision II天博体育官网毫无疑问,但他解释说,合同提供了无价的“安心”,并允许不停地运行繁忙的成像核心。


结果

DR。米勒指出,双重激光显天博体育官网在性能,可靠性和操作简单性方面取得了无限的成功,在短短几个小时的动手培训之后,新用户通常可以操作该系统,该工具为数十个涵盖各种主题的出版物提供了数据。 Miller博士在YouTube上发布了令人印象深刻的演示文稿,其中包括他使用插入式多光摄影方法的悠久历史的许多图像和视频。

 

参考:

完整淋巴结中淋巴天博体育官网运动和抗原反应的两光子成像。

天博体育官网 MJ,Wei SH,Parker I,Cahalan MD。科学。 2002年6月7日; 296(5574):1869-73。 doi:10.1126/science.1070051。 Epub 2002 5月16日。

T天博体育官网库扫描是通过动态树突天博体育官网行为和淋巴结中随机T天博体育官网运动促进的。 Miller MJ,Hejazi AS,Wei SH,Cahalan MD,ParkerI。 doi:10.1073/pnas.0306407101。 Epub 2004年1月13日。

对淋巴结中的树突天博体育官网激活CD4+ T天博体育官网激活的单天博体育官网动力学。

天博体育官网 MJ,Safrina O,Parker I,Cahalan MD。 J Exp Med。 2004年10月4日; 200(7):847-56。 doi:10.1084/jem.20041236。

第16章。三光子显微镜和天博体育官网动力学的多维分析。

Zinselmeyer BH,Dempster J,Wokosin DL,Cannon JJ,Pless R,Parker I,天博体育官网 MJ。

方法酶。 2009; 461:349-78。 doi:10.1016/s0076-6879(09)05416-0。

 

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“创新服务合同意味着唯一的停机时间实际上是将替换天博体育官网器运送到我的实验室的时间。”

- 圣路易斯华盛顿大学医学院医学系副教授Mark 天博体育官网

 

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图2“ T天博体育官网抗原识别”的体内两光子成像揭示了随机T天博体育官网运动在启动适应性免疫反应中所起的关键作用。宫颈淋巴结中的T天博体育官网(红色)偏离高内皮静脉(粉红色),并与树突状天博体育官网进行随机接触(绿色,变焦视图)。

 

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