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新墨西哥州立大学:时间分辨流式天博体育术
挑战
新墨西哥州立大学杰西卡·天博体育流式天博体育术的独特方式。,即在化疗药物作用的情况下
休斯顿指出,时间分辨流式天博体育术与大多数现有的流式天博体育术应用明显不同,后者依赖稳态荧光强度数据来执行计数和分选功能。,她的团队必须首先构建自己的流式天博体育仪。
有两种测量荧光寿命的已知方法:在时域中或在频域中使用脉冲激光或其他光源。休斯顿解释说,“我们需要一个高通量流式天博体育仪,以便对大量天博体育进行非破坏性计数和/或分选
解决方案
除了观察nadh nadh fad等代谢物的内源性荧光外,天博体育团队还希望能够在他们的工作中使用大量不同的荧光团。团队还希望能够在他们的工作中使用大量不同的荧光团。,他们需要多个激光波长来有效激发所有这些不同的靶材。m2)
经过仔细评估,他们决定使用,coerent obis激光器。天博体育,“我们目前使用了几种obis激光器,波长分别为,375 nm 、405 nm 、488 nm 、633 nm和633nm和633nm。
成果
休斯顿表示,她的定制型流式天博体育仪和不断增加的obis激光器系列已被证明是一个成功的组合,并且已经为她的代谢分析研究和fret工作提供了大量数据。
对于代谢分析,nadh的例子,其中测量的荧光寿命取决于该代谢物在接受评估天博体育中主要是处于结合状态还是未结合状态。,ATP相关,ATP是为大多数天博体育活动提供动力的高能分子。(oxphos)来产生ATP。。
团队还使用该系统快速获取定量fret数据。数据。,以便更好地了解蛋白质,蛋白质相互作用,进行蛋白质构象研究并探索酶的作用。,休斯顿指出,“我们可以观察诸如供体荧光团是否处于淬灭状态之类的事情。我们可以观察诸如供体荧光团是否处于淬灭状态之类的事情。,该数据可以表明癌症治疗的有效性。,该数据可以表明癌症治疗的有效性。,obis激光器和我们的高通量天博体育仪确实提供了丰富的数据。”
参考文献:
- j。 Sambrano,F。Rodriguez,J。Martin和J. P. Houston,“朝着片上弹药聚焦荧光寿命流式天博体育仪的发展,”物理学的边界,2021 9:253https://www.frontiersin.org/天博体育ticle/10.3389/fphy.2021.647985
- a。 Bitton,J。Sambrano,S。Valentino和J. P. Houston,“针对天博体育和组织荧光寿命感测设计的新的高通量方法的回顾”,《物理学边界》,2021 9:163https://www.frontiersin.org/天博体育ticle/10.3389/fphy.2021.648553
- k。 Nichani,J。Li,M。Suzuki和J. P. Houston,“用荧光寿命寿命的天博体育仪测量和相分析分析的凋亡过程中caspase-3活性的评估”,“天博体育仪” A,2020 97(12):1265-1275;PMC7738394
- f。 Alturkistany,K。Nichani,K。D。Houston和J. P. Houston,“通过时间分辨流式天博体育仪测量的凋亡过程中NAD(P)H的荧光寿命偏移”,天博体育术A 2019; 95(1):70-79PMC6587805
“ obis天博体育器支持我们在工作中进行快速直接的数字调制,并且添加和移除这些即插即用天博体育器非常容易,它们的外形和尺寸都完全相同,能够提供大量数据。”
- 杰西卡·天博体育(Jessica Houston)



图 1.时间分辨流式天博体育仪的关键元件。

图2。组装时间分辨流式天博体育仪。